本文的重點(diǎn)是快速液相色譜和高效液相色譜。沒(méi)有一種完美的協(xié)議合適每一種別離目的。因此，建議為您的特定使用程序優(yōu)化辦法。經(jīng)過(guò)本文中列出的建議以及一些前期閱覽和測(cè)驗(yàn)，您將輕松純化您正在尋找的組件。

        一、快速液相色譜純化

        運(yùn)用快速色譜法進(jìn)行純化的缺陷是該辦法固有的分辨率較低�？焖僖合嗌�譜柱運(yùn)用更大的粒徑和柱容量，允許運(yùn)用更多的開(kāi)始資料，但以分辨率和純度為價(jià)值。假如化合物不需求更高的純度，或者假如下一步將進(jìn)行 HPLC，這或許是您的選擇。

        1、確認(rèn)溶劑體系

        樣品的純度（即混合物中有多少化合物）能夠運(yùn)用薄層色譜法 (TLC) 和組分的相對(duì)極性進(jìn)行定性測(cè)定。運(yùn)用 TLC 預(yù)先篩選*佳活動(dòng)相和固定相將節(jié)省時(shí)間和金錢(qián)。依據(jù)所運(yùn)用的溶劑，您或許需求在通風(fēng)柜中運(yùn)轉(zhuǎn)色譜柱，因?yàn)榇嬖跐撛诘奈ｋU(xiǎn)煙霧。

        2、確認(rèn)要運(yùn)用的列

        選擇別離柱時(shí)要考慮樣品量。色譜柱裝載量因粒徑和體積而異。一般來(lái)說(shuō)，快速液相色譜柱的*大裝載量約為硅膠重量的 10%。較大的色譜柱能夠處理千克數(shù)量的色譜柱，但假如您沒(méi)有那么多開(kāi)始資料，那么您只會(huì)在硅膠和額定的溶劑上糟蹋金錢(qián)來(lái)運(yùn)轉(zhuǎn)這些大型色譜柱。在確認(rèn)液相剖析柱、基質(zhì)和溶劑后，您就能夠進(jìn)行快速別離了。

        3、液相色譜柱

        不管您是自己裝柱還是購(gòu)買(mǎi)一根預(yù)裝柱，按重量核算硅膠與化合物的比例（即硅膠：化合物）都將幫助您完成更有用的別離。恒譜生提供各種硅膠色譜柱，像uHPLCs高效液相C18-AQ剖析柱對(duì)親水性和極性化合物具有更強(qiáng)的保存才能和選擇性。

        假如包含了別離不太雜亂的溶液需求 30:1 到 50:1 的比率，但更雜亂的別離或許需求高達(dá) 120:1 的比率。手動(dòng)運(yùn)轉(zhuǎn)色譜柱時(shí)，切勿讓溶劑管線低于硅膠，不然氣孔會(huì)在硅膠上形成看起來(lái)像裂縫的長(zhǎng)線。這大大降低了別離的功率。

         二、HPLC純化

       在 HPLC 上運(yùn)轉(zhuǎn)樣品適當(dāng)簡(jiǎn)略，因?yàn)樵诳焖僖合嗌�譜柱上預(yù)純化進(jìn)程中確認(rèn)的許多參數(shù)都能夠使用于此進(jìn)程。假如您在沒(méi)有預(yù)純化過(guò)程的情況下運(yùn)轉(zhuǎn) HPLC 別離，請(qǐng)考慮運(yùn)用上面列出的指南來(lái)開(kāi)發(fā)合適的 HPLC 辦法。運(yùn)用 HPLC 時(shí)的另一個(gè)考慮因素是核算的背壓。因?yàn)?HPLC 色譜柱的粒徑更小，可完成更高質(zhì)量的別離，因此這些體系往往在高壓條件下運(yùn)轉(zhuǎn)，而閃蒸別離的壓力相對(duì)較低。運(yùn)用有關(guān)粒徑和形狀、色譜柱內(nèi)徑和溶劑規(guī)格的信息核算估計(jì)的背壓。

       與恒譜生技術(shù)支持專(zhuān)家進(jìn)行簡(jiǎn)略評(píng)論能夠節(jié)省您名貴的時(shí)間，并使您能夠在瞬間別離化合物！